VETERİNER LABORATUVAR TEKNİKLERİ VE PRENSİPLERİ - Deneme Sınavı - 16

İdrar şeritleri ile ölçülen parametreler: pH, Özgül ağırlık, Glukoz, Keton, Protein,
Bilirubin, Ürobilinojen, Nitrit, Lökosit Eritrosit (Hemoglobin)’dir. Her bir test,
ayrı kimyasal reaksiyonlar sonucu oluşan renklerin değerlendirilmesi ile ölçülür.

Beyin omurilik sıvısı (BOS) analizi enfeksiyon (bakteriyal, fungal, mikobakteriyel
veya amebik menenjit), kanser, subaraknoid kanama, multipl skleroz veya demiyelizan hastalıkların ayırıcı tanısı için kullanılır.

Torasentez: Plevran boşluğundaki sıvının alınması işlemine torasentez denir. Tanı
ve tedavi amaçlı olabilir.

İyi bir tamponlama elde edebilmek için tampon pH’sının pH = pK_a ±1 civarında olması gerekir. Doğru cevap A'dır.

Elektroforez, çeşitlilik arz eden ve iyonize olabilen analitlerin ayırımına yönelik çok yönlü ve güçlü analitik tekniktir. Yük taşıyan çözünmüş maddeler veya parçacıkların sıvı ortamda elektriksel alanın etkisiyle göç etmesi elektroforez tekniğinin kapsamını oluşturur.

Göç etme hızı; molekülün net yükü, elektriksel alan şiddeti, çalışma ısısı,destek materyalin özelliği gibi faktörlerden etkilenir.

Net tük ve destek materyalin gözenek çapı ile doğru, molekül büyüklük ve akışkanlık ile ters orantılıdır.

Elektroforetik işlemde tampon çözeltilerin birden fazla görevi bulunmaktadır. Bunlar; akımı iletmek, elektroforezin gerçekleştirildiği pH yı oluşturmak, çözünen analitin yükünü belirlemek olarak sıralanabilir.

Elektroforezde kullanılan destek ortamlarının bazıları suyla temas ettiğinde hidroksil iyonlarını adsorbe ederek negatif yüklenir. İyonlar yüzeye bağlanarak hare- ketsiz kalır. Çözeltide var olan pozitif iyonlar bu eksi yüklü sabit bölgeler etrafında kümelenerek bulut meydana getirirler. Bulutla ilişki halinde bulunan negatif iyon miktarı sabitlenmiş halde bulunan negatif iyonlardan uzaklaştıkça artar ve sonunda her iki iyon konsantrasyonu eşitlenerek dengeye ulaşır. Sisteme akım uygulan- dığında destek ortamına bağlı olan iyonlar sabit kalır fakat diğerleri kendilerinin aksi kutbuna serbestçe hareket etmeye başlarlar. İyonlar yüksek oranda hidratize olduğundan kendilerinin hareketi içinde yer aldıkları çözücününde hareket etmesine neden olur. Bu fenomen endozmoz olarak tanımlanır ve bu olay sonucunda su tek yönde hareket eder.

Jel filtrasyonda moleküllerin büyüklüklerine göre ayrım sağlanır. Adsorpsiyon kromatografinin esasını, çözünmüş maddelerin katı yüzeyde soğrulma (adsorpsiyon) ve salınma olayları arasındaki fark oluşturur. Çözünen maddelerin birbirine karışmayan iki sıvı arasında dağılımı partisyon kromatografinin temelini oluşturur. İyon değişim kromatografi, yüklü yüzey moleküllerine sahip sabit faz ile bunun zıt yüküne sahip hareketli faz arasında iyonların yer değişimi esasına dayanır. Afinite kromotografisi analit ve bağlayıcı molekülün birbirine eşsiz bir biçimde bağlanması yöntemin esasını oluşturur.

Jel filtrasyonda moleküllerin büyüklüklerine göre ayrım sağlanır. Adsorpsiyon kromatografinin esasını, çözünmüş maddelerin katı yüzeyde soğrulma (adsorpsiyon) ve salınma olayları arasındaki fark oluşturur. Çözünen maddelerin birbirine karışmayan iki sıvı arasında dağılımı partisyon kromatografinin temelini oluşturur. İyon değişim kromatografi, yüklü yüzey moleküllerine sahip sabit faz ile bunun zıt yüküne sahip hareketli faz arasında iyonların yer değişimi esasına dayanır. Afinite kromotografisi analit ve bağlayıcı molekülün birbirine eşsiz bir biçimde bağlanması yöntemin esasını oluşturur.

Organizmada 5 ana protein sınıfı immünoglobinler olarak bilinir ve her grubun farklı kimyasal yapısı ve özel bir biyolojik rolü vardır. Immunglobulin G (IgG) en sık kullanılan immunokimyasal reaktif olup molekül ağırlığı 158000 Da olan bir glikoproteindir ve iki dupleks zincirden oluşmaktadır.

Molekül ağırlığı en az 4000-5000 Da olması gerekir.

Antijen- antikor bağlanmasını etkileyen kimyasal faktörler; iyonik türler, iyonik kuvvet ve polimerik moleküllerdir.

ELİSA; enzimle işaretli antijen ya da antikorun serbest antijen ya da antikor ile reaksiyona girmesi ve oluşan antijen antikor kompleksinin enzim aktivitesinin enzime spesifik substrat varlığında ortaya konması esasına dayanan ölçüm tekniğidir.

RIA, bir izotopla işaretli antijenin, işaretlenmemiş antijenle yarışmaya girerek antikorla bağlanmasına dayanır. IRMA yönteminde ise işaretli antijen yerine, saflaştırılmış ve işaretlenmiş antikor kullanılmaktadir. CPB, belirli bir antikor yerine belirli bir hormon veya hormon sınıfına özgül affinitesi olan doğal plazma proteinleri (genellikle immunglobulin haricindeki globulinler tercih edilir) kullanılır.

Laboratuvarlarda kullanılan plastik malzemeler, metal iyon kontaminasyonu gidermek için 0.001 M EDTA ile yıkanır.

Yüksek sıcaklığa dayanıklı olmayan çeşitli besiyeri ve çözeltilerin su banyosunda düşük sıcaklıkta 80 °C’de 60 dakika 3 gün üst üste ısıtılarak sterilize edilmesine tindalizasyon denir.

Laboratuvarda palto gibi kısıtlayıcı kıyafetler, sandalet gibi açık ayakkabılar giyilmesi ve kontak lens takılması sakıncalıdır.

Laboratuvarda asit veya alkali dökülmesi halinde dökülen yer bol akar suda yıkanmalıdır.