TEMEL VETERİNER HİSTOLOJİ VE EMBRİYOLOJİ

Otoradyografi: Doku içinde yer alan radyoaktif materyali bir doku kesiti aracılığı ile üzerinde yer alan fotoğraf emülsiyonuna aktaran metoddur. Bu yöntem ışık ve elektron mikroskopların her ikisinde de kullanılabilir. Büyük moleküllerin öncüsü olan aminoasit ve nukleotid gibi küçük moleküller radyoaktif atomların yapısına bağlanabilir. İşaretlenmiş olan bu küçük moleküller canlı hayvan, hücre ya da doku kültürüne enjekte edildiğinde radyoaktivite izlenebilir. Bu yöntem ile DNA sentezi, hücre bölünmesi, hücrede protein sentezi ve salgılanması incelenebilir.

İmmunositokimya: İşaretlenmiş antikorlar ile hücre ve doku antijenlerinin gösterilmesini sağlayan tamamen antijen antikor spesifikliğine dayanan bir tekniktir. İmmunositokimya ilk kez Albert H Cons (1941, 1950) ve arkadaşları tarafından uygulanmıştır. Bu araştırmacılar bir antikoru fluoresan boya ile işaretleyerek doku kesitlerinde antijenleri göstermişlerdir. Bu antijen antikor reaksiyonu spesifikliğine dayandığı için sonuçların tam anlamı ile güvenilir olması, histopatolojide birçok belirsizliğin ortadan kalkmasına ve teknik ile ilgili çalışmaların daha fazla gelişmesine neden olmuştur.

Hücre ve doku kültürü tekniklerinin kullanım alanları:

TEM Tekniği: Işık mikroskopide kullanılan temel basamaklar TEM’de de vardır, ancak daha yüksek büyütme gücü nedeni ile proteinlerin çapraz bağlarının daha spesifik olması gerekmektedir. Bu amaçla tespit için glutaraldehid, paraformaldehid, osmium tetraoksid, potasyum permanganat’ın tamponlu solusyonları kullanılır.