TEMEL VETERİNER HİSTOLOJİ VE EMBRİYOLOJİ

Perfüzyon tespiti: Anestezi altındaki canlının göğüs boşluğu açılır, kalbin sol ventrikulusundan girilerek belli bir basınç ile serum fizyolojik verilir, sağ atriumda açılan karşı bir delikten serum fizyolojik boşalana kadar bu işleme devam edilir. Serum fizyolojik gelmeye başladıktan sonra aynı noktadan aynı yöntemle tespit solüsyonu verilmeye başlanır (pH: 7.4). Canlı tamamı ile tespit olana dek bu işleme devam edilir (tespit olduğunu ekstremitelerin gerilmesi, burun ucu ve mukozaların tespit solüsyonunun rengini almasından anlayabiliriz). Bu tespit yöntemi total perfüzyondur. Aynı işlem tek bir organa giren ve çıkan damarlar aracılığı ile yapıldığında organ perfüzyonu olur.

Mikrometre (µm ya da µ) = 10^-6 m = 10^-3 mm = 10³ nm = 10⁴ Å

Histoloji tekniğinde doku örneklerinin alınmasından bloklama aşamasına kadar yapılan işlemlere ya da izlenen sürece doku takibi adı verilir. Doku takibi aşamaları elle takip edilerek yapılabildiği gibi ototeknikon adı verilen bir cihaz ile tamamen otomatik olarak da yapılabilir.

Boyama işlemi doku takibi adı verilen sürecin sonrasında yapılan bir işlemdir.

Asit fuksin, eosin, anilin blue, orange G asidik karakterli boyalardır. Pironin ise bazik karakterli olup reaksiyon rengi kırmızı olan bir boyadır.

Giemsa Wright Boyası, kan hücrelerini tanımlamak için kullanılır. Reaksiyon sonucunda eritrositler ve eosinofil gra. - pembe; lökosit çek., bazofil gra. - mor ve lenfosit, monosit sitoplazma - mavi olarak boyanır.

Histoloji Tekniğinde Temel Aşamalar

• Materyalin(doku örnekleri) alınması
• Tespit (fikzasyon) ve yıkama
• Suyunu giderme (dehidrasyon)
• Parlatma veya saydamlaştırma
• Emdirme
• Gömme veya bloklama (blokaj)
• Kesme (kesit alma) ve lama yapıştırma
• Boyama ve kapatma

Yaygın kullanılan madde xylol olmakla birlikte benzen, toluen, chloroform, methylbenzoat, sedir yağının da kullanılabildiği ve dokuları saydam hale getirmek için yapılan işlem parlatma veya saydamlaştırma işlemidir.

Artefakt, dokularda gerçekte var olmayan ancak histoloji tekniğinde kullanılan temel aşamalar ya da doku takibi sırasında oluşan ve boyanmış preperatlarda görülen istenmeyen oluşumlardır. Artefaktlar, kesit yüzeyinde boşluklar, dalgalanmalar, farklı tonlarda boyanmalar, boya kristallerinin çökmesi, hava kabarcıkları gibi birtakım görüntüler ile tanımlanabilir.

İşaretlenmiş antikorlar ile hücre ve doku antijenlerinin gösterilmesini sağlayan tamamen antijen antikor spesifikliğine dayanan bir tekniktir. İmmunositokimya ilk kez Albert H Cons (1941, 1950) ve arkadaşları tarafından uygulanmıştır. Bu araştırmacılar bir antikoru fluoresan boya ile işaretleyerek doku kesitlerinde antijenleri göstermişlerdir. Bu antijen antikor reaksiyonu spesifikliğine dayandığı için sonuçların tam anlamı ile güvenilir olması, histopatolojide birçok belirsizliğin ortadan kalkmasına ve teknik ile ilgili çalışmaların daha fazla gelişmesine neden olmuştur.

Bazı bazik boyalar reaksiyona girdikleri doku komponentlerini normal renklerinden farklı, maviden kırmızı ve mora değişen tonlarda boyarlar. Bu absorbsiyon değişikliğine metakromazi denir.

Hücre ve hücrelerarası maddeyi canlılığın sona erdiği andaki yapısal özellikleri ile korumak için yapılan işleme tespit (fikzasyon) denir. Doğru cevap B'dir.

Mikroskop: Çıplak gözle görülemeyen oluşumları tanımlamak ve değerlendirmek amacıyla ışın ve optik ilkelerine dayanarak yapılmış büyütme ve görme cihazıdır. Doğru cevap D'dir.

Dondurma, doku örneklerinin süratle dondurulması ve dondurma mikrotomu ya da cryotom adı verilen özel cihazlar aracılığı ile kesitler alınır. Doğru cevap:A

Difüzyon, moleküllerin ya da iyonların yüksek konsantrasyonlu bir alandan düşük konsantrasyonlu alana geçmesidir. Doğru cevap C'dir.

Kimyasal yapısı bazik, reaksiyon rengi ise kırmızı olan boya maddesi pironin'dir. Doğru cevap E şıkkıdır.

kimyasal yapısı asidik, reaksiyon rengi ise mavi olan boya maddesi anilin blue'dir. Doğru cevap B'dir.

Periodic Asit Schiff boyama tekniğinin amacı glikojen ve karbonhidrattan zengin moleküller içindir. Doğru cevap A'dır.

Dondurma aşamasında buz kristallerinin oluşumunu önlemek için kriyoprotektanlar kullanılır. Doğru cevap C'dir

Pikrik asit (C6H2(NO2)3OH): Patlayıcı özelliği olan parlak sarı renkte kristal bir maddedir. Dokuya difüzyonu hızlıdır. Doğru cevap A şıkkıdır.

Histoloji alanında kullanılan özel inceleme yöntemleri; Otoradyografi, Histootoradyografi, Histokimya, İmmunositokimya ve Hücre ve Doku Kültürü'dür. Doğru cevap D şıkkıdır.